오늘 소개해드릴 제품은 Pall사의 BLOTTING Membrane제품입니다.
사진출처:
Northern 및 Southern blotting은
각각 RNA 및 DNA의 식별 및 정량화를위한 표준 분자 생물학 기술입니다.
분자 생물학 연구에서 RNA 및 DNA의 효과적인 분리 및 검출은
진단 및 산업 응용 분야에서 사용되는 유전자 발견,
시퀀싱(sequencing) 및 맵핑(mapping)에 중요합니다.
블로팅 과정에서 중요한 것은 시각적 결과의 명확성입니다.
노던 및 서던 블롯 분석 방법은 핵산 고정화를 기반으로 합니다.
RNA 및 단편()은 식별, 검출 및 시각화를 위해 거대 분자 프로브(probes)를 사용할 수 있도록 막에 크기별로 분리됩니다.
명확한 결과를 얻으려면 재 작업 및 지연을 방지하기 위해 사용되는 transfer membrane에 다음이 필요합니다.
l 적절한 수준의 감도
l 낮은 배경 소음(Low background noise)
l 표면 일관성
멤브레인필터
Pall
이러한 Pall사의 Membrane 필터의 제품별 종류와 특장점에 대해 설명드리겠습니다.
Northern blot transfer는 다양한 RNA의 혼합물 중에서 특정 RNA 서열을 검출하는 데 사용됩니다.
이 기술은 조직 샘플 또는 세포 배양에서 RNA의 발현을 특성화하는 데 사용할 수 있습니다
Southern blotting은 크고 복잡한 DNA 샘플에서 특정 DNA 서열을 검출하는 데 사용되는 분자 생물학 기술입니다.
Southern blot 방법은 제한 단편의 분자량을 결정하고 다른 샘플에서 DNA의 상대적인 양을 측정하는 데에도 사용할 수 있습니다.
DNA 샘플은 조직 또는 분리 된 세포 배양에서 얻을 수 있습니다.
애플리케이션에 적합한 멤브레인 선택
Pall의 Biodyne® Nylon Transfer Membrane 제품군은
다양한 응용 분야에 대해 다양한 흡착 특성을 가진 다양한 화학 물질을 제공합니다.
당사의 Biodyne A, Biodyne B 및 Biodyne Plus 멤브레인은
모든 방사성 및 비 방사성 검출 방법에 대해 높은 감도, 낮은 배경 및 로트 간 일관성을 제공합니다.
이러한 멤브레인은 본질적으로 친수성이므로 멤브레인 전체에 쉽게 젖을 수 있습니다.
이들의 안정성과 내구성은 하이브리드 화, 스트리핑 및 재 프로빙의 여러 사이클을받을 때
균열, 수축 또는 찢어지지 않도록 보장합니다.
Biodyne® Nylon Transfer Membranes
Biodyne A Membrane: 양쪽 성 (Amphoteric)은
멤브레인. 제타 전위(zeta potential)가 pH 변화에 의해 조절 될 수 있음을 의미합니다.
단일 프로브 또는 다중 재혼 성화 및 배경이 문제가되는 애플리케이션에 이상적입니다.
백그라운드가 문제일 경우 추천 가능
Biodyne B Membrane: 양전하를 띠는 멤브레인. 핵산 응용 분야를 위한 고감도 나일론 막.
DNA, RNA Blotting에서 쓰이는 것 중 가장 높은 민감성
Biodyne Plus Membrane: 극도로 높은 등전점으로 양전하를 띠므로 pH 변화에도 전하를 잘 유지합니다.
화학 형광 검출에 적합합니다. 특정 비 방사성 검출 시스템에서는
Biodyne A 멤브레인보다 더 민감하지만 Biodyne B 멤브레인보다 배경이 낮습니다
(선택 가이드 참조).
A보다는 더 민감하면서 B보다 낮은 백그라운드, 두 장점을 모두 갖음
Biodyne C Membrane: Biodyne 제품군의 일부인이 멤브레인은
기공 표면의 카르복실기를 통해 결합 반응을 통해 유도체 화 될 수 있으므로 전문 응용 분야에 적용 할 수 있습니다.
Northern and Southern Transfer Membrane Selection Guide
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Product |
Biodyne A Membrane |
Biodyne B/Plus Membrane |
Biodyne C Membrane |
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Description |
Amphoteric Nylon 6,6 |
Positively-charged Nylon 6,6 |
Negatively-charged Nylon 6,6 |
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Works best for: |
Colony/Plaque Lifts, DNA and RNA Transfers |
DNA and RNA Transfers, Multiple Reprobings |
Reverse Dot Blots |
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Also suited for: |
Gene Probe Assays, DNA Fingerprinting, Nucleic acid Dot/Slot Blots, Replica Plating, ELISAs |
DNA Fingerprinting, Nucleic Acid Dot/Slot Blots, Colony/Plaque Lifts (Biodyne B membrane), Replica Plating (Biodyne B membrane) |
Protein Immobilization, Affinity Purification, ELISAs |
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Advantages |
· 고감도 · Low background · pH를 변경하여 순 변화(Net change)를 제어 할 수 있습니다. · 스트리핑(strip) 및 재 탐침(reprob) 기능 |
· 넓은 pH 범위에서 양전하 · 핵산 애플리케이션을위한 최고의 감도 (Biodyne B membrane) · 스트리핑(strip) 및 재 탐침(reprob) 기능 |
· 넓은 pH 범위에서 음전하 · 표면 카르복실기(carboxyl groups)는 유도체 화 가능 · 스트리핑(strip) 및 재 탐침(reprob) 기능 |
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Binding Interaction |
Hydrophobic & Electrostatic |
Hydrophobic & Electrostatic |
Hydrophobic & Electrostatic |
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Method of Immobilization |
UV Crosslink Baking |
Can be baked or UV crosslinked, although not required |
Derivaization |
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Detection Methods |
Radiolabled Probes, Enzyme-antibody Conjugates · Chemiluminescent · Chromogenic |
Radiolabled Probes, Enzyme-antibody Conjugates · Chemiluminescent · Chromogenic · Chemifluorescent (Biodyne Plus Membrane) |
Radiolabled Probes, Enzyme-antibody Conjugates · Chromogenic |
이러한 다양한 장점을 가지고 있는 PALL사의 BLOTTING Membrane 필터에 대해 알아보았으며
사용하시는 Application에 맞는 제품을 사용하시길 권장합니다.
이로써 이번 포스팅을 마치도록 하겠습니다.
궁금한 점 또는 문의 점 있으시면 아래 연락처 혹은 레보딕스 카카오톡으로 연락주시면 더욱
자세한 상담으로 여러분의 궁금점이 풀리실 때까지 도와드리겠습니다. 😉
