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블로팅 멤브레인 필터 (BLOTTING Membrane) [Pall-LC 폴엘씨] - 실험용/연구실 장비 및 소모품 전문 레보딕스(주)

오늘 소개해드릴 제품은 Pall사의 BLOTTING Membrane제품입니다.

사진출처:

https://www.pall.com/en/laboratory/life-science-research/dna-rna-purification/northern-and-southern-blotting.html?_ga=2.208262738.1153756482.1613463043-1666456104.1606724080

Northern 및 Southern blotting은

각각 RNA 및 DNA의 식별 및 정량화를위한 ​​표준 분자 생물학 기술입니다.

분자 생물학 연구에서 RNA 및 DNA의 효과적인 분리 및 검출은

진단 및 산업 응용 분야에서 사용되는 유전자 발견,

시퀀싱(sequencing) 및 맵핑(mapping)에 중요합니다.

 

블로팅 과정에서 중요한 것은 시각적 결과의 명확성입니다.

노던 및 서던 블롯 분석 방법은 핵산 고정화를 기반으로 합니다.

RNA 및 단편()은 식별, 검출 및 시각화를 위해 거대 분자 프로브(probes)를 사용할 수 있도록 막에 크기별로 분리됩니다.

명확한 결과를 얻으려면 재 작업 및 지연을 방지하기 위해 사용되는 transfer membrane에 다음이 필요합니다.

 

l 적절한 수준의 감도

l 낮은 배경 소음(Low background noise)

l 표면 일관성

 


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멤브레인필터

Pall

이러한 Pall사의 Membrane 필터의 제품별 종류와 특장점에 대해 설명드리겠습니다.

Northern blot transfer는 다양한 RNA의 혼합물 중에서 특정 RNA 서열을 검출하는 데 사용됩니다.

이 기술은 조직 샘플 또는 세포 배양에서 RNA의 발현을 특성화하는 데 사용할 수 있습니다

 

Southern blotting은 크고 복잡한 DNA 샘플에서 특정 DNA 서열을 검출하는 데 사용되는 분자 생물학 기술입니다.

Southern blot 방법은 제한 단편의 분자량을 결정하고 다른 샘플에서 DNA의 상대적인 양을 측정하는 데에도 사용할 수 있습니다.

DNA 샘플은 조직 또는 분리 된 세포 배양에서 얻을 수 있습니다.

 

애플리케이션에 적합한 멤브레인 선택

Pall의 Biodyne® Nylon Transfer Membrane 제품군은

다양한 응용 분야에 대해 다양한 흡착 특성을 가진 다양한 화학 물질을 제공합니다.

당사의 Biodyne A, Biodyne B 및 Biodyne Plus 멤브레인은

모든 방사성 및 비 방사성 검출 방법에 대해 높은 감도, 낮은 배경 및 로트 간 일관성을 제공합니다.

이러한 멤브레인은 본질적으로 친수성이므로 멤브레인 전체에 쉽게 젖을 수 있습니다.

이들의 안정성과 내구성은 하이브리드 화, 스트리핑 및 재 프로빙의 여러 사이클을받을 때

균열, 수축 또는 찢어지지 않도록 보장합니다.

Biodyne® Nylon Transfer Membranes

Biodyne A Membrane: 양쪽 성 (Amphoteric)은

멤브레인. 제타 전위(zeta potential)가 pH 변화에 의해 조절 될 수 있음을 의미합니다.

단일 프로브 또는 다중 재혼 성화 및 배경이 문제가되는 애플리케이션에 이상적입니다.

백그라운드가 문제일 경우 추천 가능

 

Biodyne B Membrane: 양전하를 띠는 멤브레인. 핵산 응용 분야를 위한 고감도 나일론 막.

DNA, RNA Blotting에서 쓰이는 것 중 가장 높은 민감성

 

 

Biodyne Plus Membrane: 극도로 높은 등전점으로 양전하를 띠므로 pH 변화에도 전하를 잘 유지합니다.

화학 형광 검출에 적합합니다. 특정 비 방사성 검출 시스템에서는

Biodyne A 멤브레인보다 더 민감하지만 Biodyne B 멤브레인보다 배경이 낮습니다

(선택 가이드 참조).

A보다는 더 민감하면서 B보다 낮은 백그라운드, 두 장점을 모두 갖음

 

Biodyne C Membrane: Biodyne 제품군의 일부인이 멤브레인은

기공 표면의 카르복실기를 통해 결합 반응을 통해 유도체 화 될 수 있으므로 전문 응용 분야에 적용 할 수 있습니다.

Northern and Southern Transfer Membrane Selection Guide

Product

Biodyne A Membrane

Biodyne B/Plus Membrane

Biodyne C Membrane

Description

Amphoteric Nylon 6,6

Positively-charged Nylon 6,6

Negatively-charged Nylon 6,6

Works best for:

Colony/Plaque Lifts,

DNA and RNA Transfers

DNA and RNA Transfers,

Multiple Reprobings

Reverse Dot Blots

Also suited for:

Gene Probe Assays,

DNA Fingerprinting,

Nucleic acid Dot/Slot Blots,

Replica Plating, ELISAs

DNA Fingerprinting,

Nucleic Acid Dot/Slot Blots,

Colony/Plaque Lifts (Biodyne B membrane),

Replica Plating (Biodyne B membrane)

Protein Immobilization,

Affinity Purification,

ELISAs

Advantages

· 고감도

· Low background

· pH 변경하여 변화(Net change) 제어 있습니다.

· 스트리핑(strip) 탐침(reprob) 기능

· 넓은 pH 범위에서 양전하

· 핵산 애플리케이션을위한 최고의 감도 (Biodyne B membrane)

· 스트리핑(strip) 탐침(reprob) 기능

· 넓은 pH 범위에서 음전하

· 표면 카르복실기(carboxyl groups) 유도체 가능

· 스트리핑(strip) 탐침(reprob) 기능

Binding Interaction

Hydrophobic & Electrostatic

Hydrophobic & Electrostatic

Hydrophobic & Electrostatic

Method of

Immobilization

UV Crosslink Baking

Can be baked or UV crosslinked, although not required

Derivaization

Detection Methods

Radiolabled Probes,

Enzyme-antibody Conjugates

· Chemiluminescent

· Chromogenic

Radiolabled Probes,

Enzyme-antibody Conjugates

· Chemiluminescent

· Chromogenic

· Chemifluorescent (Biodyne Plus Membrane)

Radiolabled Probes,

Enzyme-antibody Conjugates

· Chromogenic

이러한 다양한 장점을 가지고 있는 PALL사의 BLOTTING Membrane 필터에 대해 알아보았으며

사용하시는 Application에 맞는 제품을 사용하시길 권장합니다.

 

이로써 이번 포스팅을 마치도록 하겠습니다.


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